Encyklopedia Host


Idź do treści

Skład pożywki

Uprawa


Skład i przygotowanie pożywek do roślinnych kultur tkankowych.

Pożywka ma do spełnienia dwa zadania:

  • Odżywianie, a więc dostarczenie mikro sadzonkom niezbędnych do życia soli mineralnych, wody i innych substancji, których nie może sam wytworzyć,
  • Stworzenie środowiska fizycznego właściwego dla rozwoju eksplantu.


Pożywki różnią się zawartością substancji odżywczych: makro i mikroelementów, witamin, węglowodanów i stymulatorów wzrostu.
Stosuje się ją najczęściej w postaci galarety używając substancji żelującej agar-agar.
Pożywką którą rutynowo stosuje się na początku każdych badań jest pożywka
Murashige Skoog (MS) z licznymi modyfikacjami. Nazwa pożywki pochodzi od amerykańskiego naukowca pochodzenia japońskiego.
Jednak pożywka musi być każdorazowo modyfikowana i przetestowana dla każdego rodzaju rośliny zgodnie z jej wymaganiami w kolejnych stadiach hodowli to jest mnożenia, wzrostu, korzenienia oraz innych, wymaganych w trakcie produkcji. Szczególnie ważny jest precyzyjny dobór ilości i proporcji hormonów. Hormony takie jak Kinetyna, BAP, IAA, IBA stosuje się w ilościach 1 do 5 mg/l pożywki.

Po odpowiednim rozpuszczeniu wszystkich składników i dodaniu rozgrzanego Agaru reguluje się kwasowość pożywki zależnie od wymagań rośliny.
W temperaturze 35° C jest ona w stanie ciekłym wlewa się ją do różnego typu transparentnych pojemników jak probówki, słoje, pojemniki plastykowe.

Do pojemnika wlewa się przeciętnie 50-60 ml pożywki. Pojemniki po ich zamknięciu sterylizuje się w autoklawie, w temperaturze 121° C przez od 18 do 21 minut. Czas sterylizacji zależy od wielkości pojemników i wielkości całego wsadu do autoklawu. Krótszy czas pozwala na uzyskanie lepszej jakości pożywki ponieważ dłuższy czas sterylizacji powoduje większą destrukcję cukrów, hormonów i witamin zawartych w pożywkach. Jednak dłuższy czas sterylizacji zwiększa pewność że pożywka jest odpowiednio wyjałowiona. Po sterylizacji pożywka w pojemnikach stygnie w sposób naturalny i przybiera postać galarety. Gotowa jest do użycia.



Grupy związków chemicznych wchodzących w skład pożywek:

  • woda,
  • makroelementy (zw. nieorganiczne): N, P, K, Ca, Mg, S,
  • mikroelementy (zw. nieorganiczne): Cl, B, Mn, Zn, Mo, Co, Cu,
  • źródła Fe + EDTA,
  • źródło węgla (organiczny składnik pożywki, najczęściej sacharoza),
  • witaminy,
  • hormony roślinne lub syntetyczne regulatory wzrostu.


Skład pożywki MS stosowanej w kulturach in vitro (w mg/l):

Makroelementy:

  • KNO3-1900
  • KH2PO4-170
  • NH4NO3-1650
  • MgSO4x7H2O - 370
  • CaCI2x2H2O - 440


Mikroelementy:

  • H3BO3 - 6.2
  • MnSO4x4H2O - 22.3
  • CoCI2x6H2O - 0.025
  • CuSO4x5H2O - 0.025
  • ZnSO4x7H2O - 8.6
  • Na2MoOx2H2O - 0.25
  • KJ - 0.83
  • Fe-EDTA -27.8
  • Na2EDTAx2H2O - 37.3


Związki organiczne:

  • Mezo-inozytol - 100
  • Sacharoza - 30 000
  • Glicyna - 2.0


Witaminy:

  • Tiamina-0.1
  • Pirydoksyna - 0.5
  • Kwas nikotynowy - 0.5
  • Agar-agar - 0.7%


kwasowość pH - 5.


Wszystkie prawa zastrzeżone. Kopiowanie materiałów ze strony wyłącznie za zgodą właściela witryny. | andrzej.pach@wp.pl

Powrót do treści | Wróć do menu głównego